Peptide bloquant

Un peptide bloquant (aussi appelé peptide compétiteur ou peptide neutralisant) est le peptide synthétique libre correspondant à la séquence de l’immunogène utilisé pour produire un anticorps donné. Il est fourni avec l’anticorps dans un seul but : démontrer qu’un signal observé provient bien de l’épitope visé.

Principe du contrôle

L’anticorps est pré-incubé avec un excès molaire du peptide — couramment un excès de plusieurs fois à cent fois, optimisé empiriquement — avant d’être appliqué sur le blot, la plaque ou la coupe. Si le signal est spécifique de l’épitope, il doit être aboli ou fortement réduit ; les bandes qui persistent sont non spécifiques ou reflètent un épitope distinct à réactivité croisée. Les conditions bloquée et non bloquée doivent être réalisées côte à côte sur le même échantillon, et il est utile d’inclure une condition peptide seul pour confirmer que le peptide lui-même n’apporte aucun signal.

Les limites doivent être énoncées clairement : ce contrôle prouve la dépendance à l’épitope, non que la protéine marquée est celle que vous supposez. Une protéine sans rapport partageant ce court épitope linéaire se comporterait de manière identique. L’invalidation ou l’extinction génétique reste le contrôle de spécificité le plus solide ; le blocage peptidique est le contrôle pratique.

Termes et matériels associés

polyclonal vs monoclonal · IgG purifiées · ELISA · séquence native. Matériel de référence : anticorps, banques de peptides. Pour aller plus loin : les anticorps en recherche sur les peptides.