Reinheit

Die Reinheit auf einem Peptidzertifikat ist fast immer die chromatographische Reinheit: die Fläche des Hauptpeaks geteilt durch die integrierte Gesamtfläche eines Umkehrphasen-HPLC-Laufs, ausgedrückt in Prozent. Eine Angabe von ≥98% bedeutet, dass mindestens 98% des bei 214 nm detektierten UV-Signals unter dieser Methode als ein einziger Peak eluiert sind.

Was die übrigen Prozent sind

Der Rest ist typischerweise synthesebedingt: Deletionssequenzen, denen ein Rest fehlt, unvollständig entschützte Ketten, oxidiertes Methionin, deamidiertes Asparagin oder Dimere. Diese sind dem Zielmolekül strukturell ähnlich, weshalb sie in seiner Nähe eluieren und eine gut auflösende Methode wichtiger ist als die Schlagzeilenzahl.

Reinheit ist nicht Gehalt

Die Unterscheidung, an der viele scheitern: Die Reinheit bezieht sich auf das, was der Detektor sieht. Restwasser, das Acetat- oder TFA-Gegenion und nicht absorbierende Hilfsstoffe besitzen keinen Chromophor und fließen nicht in die Berechnung ein. Ein zu 99% reines Peptid kann gewichtsmäßig dennoch zu 15–25% aus Salz und Wasser bestehen. Der Nettopeptidgehalt ist eine separate Bestimmung, meist per Aminosäureanalyse.

Warum das wichtig ist

Für die meisten vergleichenden Forschungsarbeiten liegt die praktische Untergrenze bei ≥98%, und der Unterschied zwischen 98% und 99% ist weniger wichtig als die Frage, ob die Identität für dieselbe Charge per Massenspektrometrie bestätigt wurde.

Verwandte Begriffe

Analysenzertifikat. Siehe HPLC-Reinheit erklärt.