Pureza

La pureza que figura en el certificado de un péptido es casi siempre la pureza cromatográfica: el área del pico principal dividida por el área total integrada en una HPLC de fase inversa, expresada como porcentaje. Un ≥98% declarado significa que al menos el 98% de la señal UV detectada a 214 nm eluyó como un único pico con ese método.

Qué es el porcentaje restante

El resto suele estar relacionado con la síntesis: secuencias de deleción a las que falta un residuo, cadenas desprotegidas de forma incompleta, metionina oxidada, asparagina desamidada o dímeros. Son estructuralmente próximos a la diana, razón por la que eluyen cerca de ella y por la que un método bien resuelto importa más que la cifra principal.

La pureza no es el contenido

La distinción que confunde a muchos: la pureza es relativa a lo que ve el detector. El agua residual, el contraión acetato o TFA y los excipientes que no absorben carecen de cromóforo y quedan excluidos del cálculo. Un péptido con un 99% de pureza puede seguir siendo entre un 15 y un 25% sal y agua en peso. El contenido peptídico neto es una determinación aparte, normalmente por análisis de aminoácidos.

Por qué es importante

Para la mayor parte de la investigación comparativa, el mínimo práctico es ≥98%, y la diferencia entre el 98% y el 99% importa menos que el hecho de que la identidad se haya confirmado por espectrometría de masas en el mismo lote.

Términos relacionados

certificado de análisis. Consulte la pureza HPLC explicada.